NMKL-nytt Tilbake til startsiden
Nr. 43/00, Mars 2000

Nyhetsbulletinen for Nordisk Metodikkomité for Næringsmidler

Ny NMKL metode
Nedlagte metoder
Spørsmål/kommentarer vedrørende Listeria monocytogenes metoden
Spørsmål vedrørende Salmonella metoden
Prisøkning
Seminar
Nylig publiserte metoder på finsk

Ny NMKL metode:
 NMKL-metod nr 144, Enterobacteriaceae Bestämning i livsmedel och foder, har reviderats.
 Metoden är avsedd att användas vid undersökning av livsmedel och foder. Bestämda mängder av spädningar av livsmedel gjutes in i violettrött-galla-glukos-agar. Bakterier tillhörande familjen Enterobacteriaceae bildar rosa till röda kolonier med eller utan utfällningszon. Efter inkubering vid 37oC i 22-26 timmar konfirmeras ett antal kolonier med oxidastest.

Metoden avprövades vid livsmedelsverket 1994 med mindre gott resultat (Livsmedelsverkets rapport nr 6/94). Det dåliga resultatet beror på flera faktorer. I metoden angavs att man skulle räkna rosa till röda kolonier med en storlek >0.,5 mm i diameter. Det är svårt att avgöra om en kolonis storlek, speciellt då den är så liten som 0,5 mm. Avläsningen blir subjektiv. Vidare kommer variationer i inkubationstid och –temperatur att påverka kolonistorleken. Vid revideringen har inkuberingstiden angivits till 24±2 timmar och gränsen för kolonistorlek har tagits bort. Alla skära till röda kolonier räknas.

Per Norberg

NMKL retter en stor takk til Per Norberg og Livsmedelsverket i Sverige for utarbeidelse av metoden.

Tilbake til toppen

Følgende NMKL-metoder er lagt ned, og anmodes derfor om at tas ut av deres metodesamling:

Nr. 1, 1950: Borsyre. Bestemmelse af Borsyre.

Nr. 72, 1970: Difenyl. Bestämning i citrusfrukter och marmelad av citrusfrukter samt i äpplen och päron.

Nr. 19, 1955: Fluor. Bestemmelse af fluor i kalkpræparater og i cerealier, tilsat kalkpræparater.

Nr. 78, 1970: Laktos. Bestämning i mjölkchoklad.

Nr. 73, 1970: Ortofenylfenol. Bestämning i citrusfrukter och marmelad av citrusfrukter samt i äpplen och päron.

Tilbake til toppen

Spørsmål/kommentarer vedrørende
Listeria monocytogenes metoden

Spørsmål og kommentarer vedrørende NMKL metode nr 136, 2.utg. 1999., gjengis her da det forhåpentligvis kan være til nytte for flere.

- Aflæsning af selektive plader angives til 24± 3 timer og igen efter 48± 4 timer (samme angivelse findes i NMKL 66, 1999). Set i lyset af akkreditering, afvigelse fra forhold beskrevet i officielle metoder samt evt. krav om dokumentation, kunne det være en fordel, om bla. tidsgrænser kun angives, hvor der er en faglig begrundelse for dem. Kan aflæsningen af pladerne efter 1 døgn ikke betragtes som en støtteaflæsning til aflæsningen efter 48± 4 timer og betydningen af ± 3 timer i forhold til de 24 timer derfor unødvendig?

Referenten Birgit Nørrung, Fødevaredirektoratet, Danmark, besvarer spørsmålet: Det er selvfølgelig korrekt, men man har i NMKL forsøgt at harmonisere disse tidsangivelser ved alle temperaturangivelser, derfor ± 3. Det burde ikke være noget problem.

- Ved noen laboratorier har det vist seg å være nyttig å erstatte en utstryking av en av enkeltkoloniene med en utstrykning på Blodagar fra den tette veksten på selektivskålene. Dette vil gjøre det lettere å skille ut et lavt antall hemolytiske Listeria spp. fra en høy bakgrunnsflora med anhemolytiske Listeria spp. siden disse ikke kan skilles fra hverandre på selektiv-skålene. Andre laboratorier har funnet det praktisk å benytte Blodagar sammen med Oxford- og Palcamagar allerede ved primærutsæd. Hemolytiske kolonier vil også i dette tilfellet kunne skilles ut fra en anhemolytisk bakgrunnsflora.

Tilbake til toppen

Spørsmål vedrørende Salmonella metoden

NMKL har mottatt spørsmål vedrørende NMKL metode nr 71, 5.utg. 1999. Referenten, Christer Wiberg, Livsmedelsverket, Sverige, besvarer spørsmålene i bulletinen, da de kan være av interesse også for andre.

- Ved inkubation af pre-opformeringen specificeres inkubationstiden til 18±2 timer, der dog - hvis dette ikke er praktisk - kan udvides til 21±3 timer. Hvorfor denne formulering, som jo reelt betyder at inkubationstiden er mellem 16 og 24 timer.

Det finns belagt i litteraturen att 18±2 timmar ger det bästa resultatet. Efter ca 20 timmar kan det för vissa prover ske en drastisk pH-sänkning, vilket kan leda till att ett något färre (mindre) antal prover blir positiva. Jag anser att den korrekta inkuberingstemperaturen skall vara 18±2 timmar. Tillägget på 21±3 timmar togs med som en kompromiss (till andra nationalkommittéers åsikter) för att möjliggöra att ett laboratorium kan preinkubera prover från förmiddag dag 1 till nästa dags förmiddag. Slutsatsen är att man alltid skall välja 18±2 timmar så länge det är praktiskt möjligt för laboratoriet. Denna tid är också i överensstämmelse med många andra internationella metoder t.ex. ISO.

Samma gäller för denna fråga om inkuberingstiden för RVS. Den fackliga aspekten är att en förlängning till 48 timmar ej leder till ett försämrat resultat med avseende på fyndfrekvensen - det finns till och med några undersökningar som visat att man kan erhålla fler positiva prover vid 48 jämfört med 24 timmar. Rent praktiskt vill man ju erhålla ett svar på sina Salmonella-analyser så fort som möjligt. Huvudskälet till att alternativet 48 tim. medtogs i metoden är att möjliggöra en analysstart på fredag och inkubera anrikningsbuljongen från lördag till måndag morgon för att undvika arbete på söndagar.

* Egentligen ger texten under punkt 6.2 i NMKL nr 71 svaret på frågan. Personligen anser jag att man endast skall använda vattenbad, och om jag själv fått bestämma över metodtexten skulle aldrig inkubatoralternativet medtagits. Min ståndpunkt grundar jag på praktiska mätningar av luftinkubatorers temperaturvariation i tid och rum vid olika belastningar. Jag har också en långvarig praktisk erfarenhet med bland annat resultat från vår interkalibrerings-verksamhet och egna undersökningar som klart visat att användning av vattenbad jämfört med inkubator generellt sett leder till att fler positiva prover erhålls. Den optimala anrikningstemperaturen ligger runt 42,0°C - och vissa serotyper är känsliga för anrikningstemperaturer runt 42,5°C. De bästa inkubatorerna - förutsatt att de är fläktstyrda – har en temperaturvariation i tid och rum på ca 1°C. Ett vattenbad (med omrörning) har en variation som knappt är mätbar. Slutsats: Undvik onödigt kontrollarbete och använd alltid vattenbad.


- Metoden er valideret i kollaborativ afprøvning, hvilke inkubationstider blev anvendt i denne afprøvning ?

För NMKL-metoden angavs preinkubering i 18±2 timmar och för anrikning i RVS-buljong 24±3 timmar.

- I metoden angives, at der skal anvendes såvel O- som H-antiserum. Såvidt vi har forstået forudsætter test med H-antiserum, at isolaterne har været dyrket på specialmedium først. Desuden skulle bestemmelsen med H-antiserum være problematisk at udføre, bla. på grund af faseskiftet og dermed være af begrænset værdi. Spørgsmålet er således, om metoden ikke bør indskrænkes på dette punkt?

Följ metoden och renstryk på lämplig icke selektiv agarplatta och utför alla konfirmeringar med polyvalenta antisera från denna platta. Vi talar om polyvalent H-antiserum som innehåller en blandning av antisera mot de vanligaste förekommande H-antigenerna. Varken polyvalent O- eller H-antisera ger en 100% säkerhet, men genom att använda båda ökar säkerheten. Det finns alltså serovarer som ger O+, H- eller O-, H+ vid test med dessa polyvalenta antisera.

Tilbake til toppen

Prisøkning

Forrige prisøkning skriver seg fra 1993.

Ventede inntekter fra prisøkningen skal gå til stimulering av metodearbeidet.

Fra 1. mars gjelder følgende priser (i NOK):

 

NOK
Abonnement pr. år (siste økning på AU-møtet 2000)

500

Komplett samling NMKL-metoder

1800

Metoder (i løssalg) pr. stk.

150

Ringperm (hvit med innlegg) pr. stk.

40
Rapporter pr. stk.
(bortsett fra nr. 8 som koster NOK 250,-)

150
Rapport nr. 8 pr. stk.

250
Prosedyrer pr. stk.

200

 

Tilbake til toppen

Seminar om genmodificerede levnedsmidler

I forbindelse med afholdelse af NMKL’s årsmøde på Bornholm vil der fredag den 25. august 2000 blive afholdt et seminar om genmodificerede levnedsmidler. Seminaret vil blive holdt på Hotel Fredensborg, Kl. 10.00 - 18.00.

Seminaret er planlagt til at give en bred oversigt over området, med belysning af de lovgivningsmæssige aspekter og risikovurdering af genmodificerede levnedsmidler. Metoder til påvisning af GMO’er, herunder kvantitative metoder, vil blive et hovedpunkt i seminaret, med gensidig orientering fra de nordiske lande om status og erfaringer på området. Seminaret vil blive afsluttet med en diskussion af fremtidige perspektiver, herunder behovet for et nordisk samarbejde på området.

Seminaret vil bl.a. belyse hvilke organismer der anvendes, og hvilke ændringer der sker i planterne. Hvor stor udbredelsen er i forhold til det samlede areal af de pågældende afgrøder. Hvilke dyrkningsmæssige krav de gensplejsede planter stiller i forhold til ikke-gensplejsede, og hvad der kendes til uheld og uønskede effekter ved gensplejsningen.

Tilmelding til seminaret kan ske (evt. i forbindelse med tilmelding til NMKL’s årsmøde) til sekretæren for den danske nationalkommite, Inge Meyland, Fødevaredirektoratet, Mørkhøj Bygade 19, DK-2860 Søborg. E-mail: ime@fdir.dk. Tilmeldingsfrist er 1. juni 2000. Prisen for deltagelse i seminaret er endnu ikke fastlagt.

Programmet for seminaret vil foreligge i begyndelsen af april. Det vil blive udsendt til de enkelte landes nationalkommiteer, og vil desuden kunne rekvireres direkte fra Jens Kirk Andersen, Fødevaredirektoratet, Mørkhøj Bygade 19, DK-2860 Søborg. E-mail: jka@fdir.dk.

Trykk her for å komme til programmet.

Tilbake til toppen

 

Nylig publiserte NMKL metoder på finsk:

Nro. 136, 2. painos, 1999 Listeria monocytogenes. Osoittaminen elintarvikkeista.

Nro. 66, 3. painos, 1999 Koagulaasipositiiviset stafylokokit. Määrittäminen elintarvikkeista

 

Tilbake til toppen